1。方法一應(yīng)用簡單的人工操縱的液氮冷凍器來冷凍精液。塑料吸管中擴(kuò)散的精子事先用氮化聚維尼龍密封劑封閉。冷凍擴(kuò)散劑則由改良的Tyrode基質(zhì)加進(jìn)甘油、果糖、葡萄糖等、氨基酸和人血清白蛋白所組成。
2。方法二另一種簡單的冷凍保存方法使用甘油、蛋黃和檸檬酸基質(zhì)在玻璃管中的冷凍是在乙醇中完成的,再慢慢地放進(jìn)液氮。
對于有關(guān)文獻(xiàn)的評論
在有關(guān)人類精子冷凍存活方面的研究文獻(xiàn)中,有結(jié)論性和推測性的描述,從而導(dǎo)致在冷凍保存方法時的一些混淆和爭論。由于對冷凍存活因素和冷凍保存有關(guān)條件之間可能存在的相互關(guān)系并不完全了解,因此也會產(chǎn)生混淆與爭論,特別是當(dāng)研究結(jié)果是矛盾的時候。
冷凍和解凍速度:有人以為冷凍速度和解凍速度之間在冷凍存活中有關(guān)系;另一些人則以為沒有這種關(guān)系。有的結(jié)果提示解凍速度是影響冷凍存活的一個因素;而其他的研究則否認(rèn)。
蛋黃的添加:對于蛋黃是否可改善冷凍存活能力,也有爭議。有人以為蛋黃是有害的,且能降低冷凍生存能力。
甘油作為冷凍保存劑:對此也有幾種不同看法。很多文獻(xiàn)以為甘油在冷凍擴(kuò)散劑中或單獨(dú)作為冷凍保護(hù)劑使用是不可缺少的;另一些則以為它不是最佳的冷凍保護(hù)劑;還有一些甚至主張它應(yīng)從擴(kuò)散劑中刪往。目前很多精子庫均采用甘油濃度為15%的冷凍保護(hù)劑。
冷凍前精子活動能力:冷凍前活動精子百分比與精子冷凍存活率是否有關(guān),亦眾說不一。
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